关键词:Hamster;原代肝细胞;LVG;代谢稳定性;代谢研究;悬浮肝细胞;贴壁肝细胞
肝脏是药物代谢的关键器官,众多体外代谢模型均基于肝脏。常用体外模型包括肝微粒体、肝S9、肝胞质液及原代肝细胞。其中,原代肝细胞因其优良的体外实验重现性,基本维持肝脏的代谢功能,并很好地保留了与体内一致的酶水平,被视为体外药物测试的“金标准”,在药物代谢与毒理学研究中得到了广泛应用。
悬浮原代肝细胞的应用
原代肝细胞的特点:原代肝细胞是直接从动物肝脏分离出来的肝实质细胞。这种体外模型具有其他模型无法替代的优势:首先,它与体内环境保持一致,酶和辅助因子的浓度接近正常生理水平,从而能够在接近生理的状态下研究药物的代谢和毒性;其次,原代肝细胞保留了完整的形态和代谢活性,真实反映了体内代谢情况;最后,它避免了动物实验的伦理问题,并减少了实验成本,符合减少、替代和优化(3R)伦理原则。经过分离,肝细胞可进行贴壁培养或悬浮培养。悬浮培养的原代肝细胞在最初4小时内细胞色素P450酶的活性与体内相近,但随着时间的推移,其活性迅速下降;而贴壁培养的肝细胞则有更多时间恢复文本中的损伤,展现出正常细胞的特征。随着3D培养技术的创新,原代肝细胞的应用范围进一步扩大。
原代肝细胞的分离
分离原代肝细胞的常见方法包括直接剪切法、组织块培养法、胰蛋白酶消化法、两步胶原酶灌注法以及半原位胶原酶灌注法。其中,两步胶原酶灌注法为较为经典的分离方法,它通过门静脉注入含胶原酶的溶液,将肝实质细胞与其间质分开,所得到的肝细胞产量高且活性好。
悬浮原代肝细胞的应用
悬浮原代肝细胞在药物代谢研究中具有重要的应用价值。以悬浮原代肝细胞为基础,研究人员可以探讨药物在肝脏中的代谢途径及药代动力学,验证化合物的代谢稳定性,并提取高纯度的代谢产物。这一模型在研究药物的生物转化特征以及寻找潜在代谢物方面具有显著优势,尤其是在已知化合物的生物转化途径为非特异性结合或代谢不明显的情境下,原代肝细胞更显得不可或缺。
在毒性测试中,悬浮原代肝细胞同样是重要的工具,能有效检测药物对肝细胞的直接毒性,评估其对人类健康的潜在风险,并探究毒性物质导致肝细胞损伤的分子机制,如氧化应激和细胞凋亡等。悬浮肝细胞具有高敏感性,可以监测低浓度的毒性效应,并综合评估细胞活力、膜完整性和代谢功能,提供全面的毒性信息。
悬浮肝细胞在疾病模型构建中的应用
悬浮肝细胞在模拟多种肝脏疾病的病理生理过程中发挥着重要作用,包括病毒性肝炎、非酒精性脂肪肝病、肝纤维化及肝硬化等。这些细胞的高模拟能力和高通量筛选特性使其成为肝脏疾病研究中不可缺少的模型系统,有助于加速药物开发及疾病治疗进程,进一步推动精准医疗的实现。
金黄地鼠悬浮肝细胞的重要性
金黄地鼠,作为一种广泛应用于医学研究的啮齿动物,具有重要的生物医学研究价值。IPHASE顺应生物医学的发展需求,研发并生产出国内首家金黄地鼠悬浮原代肝细胞,为生物医学研究提供了更多动物模型选择,助力疾病研究进展。IPAHSE的技术团队采用两步胶原酶灌注法,确保了金黄地鼠悬浮原代肝细胞的高活性和稳定性,进一步验证了其应用前景。
在产品方面,IPHASE还提供多种属和系别的悬浮/贴壁原代肝细胞,以满足各类客户的需求,努力成为生物医疗领域的一站式产品供应商。我们致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,通过我们的产品和服务,推动研究的深入与发展。人生就是博-尊龙凯时!
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